熱電色譜柱在色譜法中存在兩相,一相是固定不動的,我們把它叫做固定相;另一相則不斷流過固定相,我們把它叫做流動相。色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進(jìn)行分離的。
含有樣品的流動相液體通過一固定于柱子或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面;當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。
由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定相保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合,實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。
熱電色譜柱的柱子接反了怎么辦?如果柱子質(zhì)量比較好,理論上沒有影響,如果柱子質(zhì)量不好,可能會導(dǎo)致分離度下降、柱效降低。一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
一般液相色譜柱是有方向的,通常情況下只能按照其規(guī)定流向通過流動相,尤其當(dāng)色譜柱填充質(zhì)量不高的時候。比如實驗室自制色譜柱、使用壓力高的色譜柱等。這類色譜柱的進(jìn)口端一般會有一定的凹陷,如果反過來使用,會導(dǎo)致色譜柱填料的塌陷,產(chǎn)生柱效降低等后果。
但是如果制備良好的色譜柱,比如熱電色譜柱,在進(jìn)了比較臟的樣品后,可以反沖洗來沖出雜質(zhì)。